- Fondation et matériaux
- matériaux
- Pas
- Examen macroscopique et microscopique
- Technique Faust originale
- Technique Faust par centrifugation
- avantage
- Désavantages
- Références
La technique Faust est une méthodologie qui permet la concentration de certains œufs et / ou larves de parasites contenus dans les fèces en flottant. Il est utilisé lorsque les tests coproparasitologiques directs sont négatifs ou lorsque vous souhaitez obtenir des échantillons propres sans détritus.
Les méthodes de concentration pour les examens coproparasitologiques sont de trois types: par flottation, par sédimentation ou par des méthodes combinant les deux précédentes. Ces méthodes augmentent les chances de résultats positifs.
Analyse des selles.
La méthode Faust consiste à mélanger une partie de l'échantillon de selles avec une substance plus dense que les œufs ou les parasites à concentrer. Cela fait que, étant moins denses, ils flottent à la surface. Le liquide surnageant est recueilli et observé au microscope pour identification et quantification.
Cette méthode est utilisée pour visualiser les œufs d'helminthes. Dans le même temps, il s'est avéré être une méthode très sensible pour le diagnostic de Giardia lamblia, un protozoaire flagellé répandu dans le monde entier. Les méthodes de flottation ne sont pas recommandées pour les œufs de parasites très lourds tels que les ténias et les trématodes.
Les parasites sont l'une des infections intestinales les plus répandues dans le monde, en particulier dans les pays pauvres où les mesures sanitaires sont insuffisantes. Pour cette raison, disposer de méthodes sensibles pour identifier et quantifier ces parasites est très utile pour le diagnostic et le traitement.
Fondation et matériaux
La technique est basée sur l'existence des différentes densités d'œufs, de parasites, de kystes, de larves et de détritus, en utilisant des solutions de sulfate de zinc comme méthode de flottation.
La justification de la technique est de mélanger l'échantillon avec une solution de sulfate de zinc qui a une densité plus élevée que les œufs plus légers, les larves ou les parasites.
Cela permet aux éléments les plus lourds de précipiter et aux éléments les plus légers de flotter qui apparaissent dans le surnageant après la centrifugation des échantillons.
matériaux
Conteneurs pour la collecte d'échantillons fécaux (Source: Bobjgalindo via Wikimedia Commons)
- Préparer une solution de sulfate de zinc de densité 1,18 ou 1,2 g / ml si l'échantillon a été préalablement traité.
- Préparez un portoir avec des tubes à essai préalablement étiquetés.
- Avoir une machine centrifuge.
- Ayez à portée de main des lames de microscope et des lamelles. Tout doit être étiqueté
- Assurez-vous qu'une solution de Lugol est disponible pour colorer les draps.
- Ayez de la gaze pour filtrer.
- Ayez des entonnoirs et de l'eau distillée.
- Localisez les contenants en plastique ou en carton étiquetés.
- Egalement applicateurs et poignée stérile de 5 mm.
- Un briquet pour stériliser la poignée.
Pas
Examen macroscopique et microscopique
Pour tout examen des selles, l'examen commence par ce que l'on appelle «l'examen macroscopique» des échantillons.
La consistance, la couleur, la présence de ce qui semble être du sang, la présence de mucus et la présence de parasites adultes sont décrites.
Ensuite, nous procédons à «l'examen microscopique» des selles, cela dépend de la méthode. La plus simple est la méthode de frottis direct, qui est la méthode d'observation microscopique la plus simple pour les parasites.
Photographie de l'observation de Gardia lamblia, un parasite intestinal (Source: Riddlemaster via Wikimedia Commons)
La procédure consiste à placer une petite quantité de l'échantillon directement sur une lame. Placez plusieurs gouttes de solution saline de taille similaire à celle de l'échantillon. Mélanger la solution saline avec les selles jusqu'à ce qu'un mélange homogène se forme. Placez une lamelle et examinez au microscope.
Technique Faust originale
La deuxième procédure consiste en la méthode du flotteur Faust, dont la version originale comprend:
1- Placez environ deux grammes de matières fécales dans un récipient adapté à cet effet.
2- Ajouter 30 ml de solution de flottation de sulfate de zinc avec laquelle une émulsion est faite en mélangeant la solution avec les fèces.
3- Filtrer avec une passoire métallique dans un deuxième récipient et transférer dans un tube à essai.
4- Ajouter plus de solution de flottation jusqu'à ce qu'un ménisque se forme dans le tube.
5- Placer une lamelle de verre sur le ménisque. Laissez reposer 10 à 15 minutes.
6- Retirez la lamelle et placez-la sur une lame, qui sera examinée au microscope.
Technique Faust par centrifugation
À l'origine, la méthode n'utilisait pas de centrifugation, mais elle est maintenant incluse car de meilleurs résultats sont obtenus. La technique implique une série d'étapes pour réaliser une procédure appropriée, ce sont les suivantes:
1- Les matières fécales sont lavées à l'eau, bien mélangées puis filtrées avec de la gaze pliée en quatre. L'échantillon est placé dans un tube à essai.
2- Centrifuger et retirer le surnageant (échantillons conservés au-dessus de l'eau). Les étapes 1 et 2 sont répétées jusqu'à ce que le surnageant soit "clair".
3- Du sulfate de zinc est ajouté à l'échantillon filtré et centrifugé.
4- Ça se mélange bien.
5- Centrifuger à nouveau pendant 1 minute à 2500 rpm (tours par minute).
6- Le surnageant est récupéré avec une boucle stérile d'environ 5 mm; les tubes ne doivent pas être secoués.
7- L'échantillon récupéré du surnageant est placé sur une lame et une goutte de Lugol peut être placée à colorier, la lamelle est placée et observée au microscope.
8- Les récipients et tubes à essai sont étiquetés.
avantage
- Les éléments utilisés pour le diagnostic peuvent être vus propres et sans «détritus», cela facilite l'observation de la feuille et réduit le temps utilisé pour le diagnostic.
- Dans le surnageant, les larves, les œufs et / ou les kystes sont récupérés.
- C'est une méthode à très faible coût.
- La procédure est très simple et facile à mettre en œuvre.
- Le diagnostic est rapide et précis.
- En raison de l'importance et de la forte incidence de la parasitose dans les pays pauvres, ces méthodes peu coûteuses et faciles à utiliser sont idéales pour le diagnostic et le suivi de ces pathologies.
Désavantages
La densité de la solution de flottation produit une contraction des larves, c'est-à-dire qu'elles rétrécissent et, en très peu de temps, peuvent se déformer. Cela oblige l'examinateur à poser le diagnostic immédiatement et les échantillons traités ne peuvent pas être conservés pour de futurs examens.
Comme pour toutes les méthodes d'identification microscopique, un personnel d'examen hautement expérimenté est nécessaire pour établir des diagnostics précis.
La déformation rapide des éléments nécessaires au diagnostic, bien qu'elle soit un inconvénient évident, peut être corrigée par des observations microscopiques immédiates.
Références
- Ananias, FL (2017). Evaluation de la sensibilité de la méthode Faust et de la sédimentation spontanée pour le diagnostic de la giardiase. Journal cubain de médecine tropicale, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P. et Smith, JW (1978). Évaluation comparative d'une technique de flottation au sulfate de zinc modifiée. Journal de microbiologie clinique, 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C. et Strube, C. (2016). Sensibilité et efficacité de certaines méthodes coproscopiques - sédimentation, sédimentation-flottation au sulfate de zinc et méthode McMaster. Recherche en parasitologie, 115 (7), 2581-2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… et Visvesvara, G. (2018). Diagnostic en laboratoire des parasites du tractus gastro-intestinal. Revues de microbiologie clinique, 31 (1), e00025-17.
- Summers, WA (1942). Une modification de la méthode de flottation centrifuge au sulfate de zinc pour la récupération des œufs d'helminthes dans les matières fécales formalisées. Journal of Parasitology, 28 (4), 345-346.