MILIEUX DE CULTURE SÉLECTIFS: FOND DE TEINT, SOLIDE ET LIQUIDE - LA BIOLOGIE - 2025

Les milieux de culture sélectifs sont des bouillons et des agars, ceux qui servent à l'isolement d'un groupe défini de microorganismes, tout en inhibant le développement des autres. Ils sont idéaux pour semer des échantillons polymicrobiens, permettant de récupérer l'agent pathogène du microbiote qui l'accompagne.

Il existe une grande variété de milieux sélectifs, entre solides et liquides. Certains sont destinés à l'isolement de bactéries Gram positives, telles que Staphylococcus à coagulase positive, Lactobacillus, Bifidobacteria, etc.

Milieux de culture sélectifs. Source: Air1404

D'autres pour la récupération d'agents pathogènes à Gram négatif, tels que les espèces des genres Salmonella, Shigella, Vibrio, Bordetella, Brucella, Pseudomonas, entre autres.

De plus, il y en a aussi pour favoriser la croissance de champignons et de levures, comme les espèces Candida, Histoplasma, Cryptococcus, dermatophytes, entre autres.

Il est à noter que certains milieux enrichis non sélectifs peuvent devenir sélectifs avec l'ajout d'antibiotiques. De même, certains milieux de culture peuvent être à la fois sélectifs et différentiels.

D'autre part, il existe des milieux de culture liquides sélectifs; certains peuvent servir de milieu d'enrichissement, favorisant l'exacerbation d'un groupe sélectif de bactéries, tout en supprimant celle des autres.

Les milieux de culture sélectifs sont largement utilisés dans les laboratoires de microbiologie pour l'analyse de divers types d'échantillons; ainsi que pour l'isolement d'une grande variété de micro-organismes d'intérêt clinique, industriel, environnemental et alimentaire.

Base

Les milieux de culture sélectifs sont basés sur des substances nutritives contenant qui favorisent la croissance d'une bactérie ou d'un champignon spécifique ou d'un certain groupe de ceux-ci, et en même temps, ils doivent contenir des substances inhibitrices qui ne permettent pas le développement d'autres microorganismes indésirables.

Parmi les substances nutritionnelles qu'ils peuvent contenir, on trouve: la digestion pancréatique de caséine, l'extrait de levure, les polypeptones, entre autres.

Les substances inhibitrices comprennent: les antibiotiques, les sels biliaires, le vert clair, le cristal violet, la fuchsine basique, l'éosine, le bleu de méthylène, le désoxycholate de sodium, le sulfite de sodium, le monoléate de sorbitan, le citrate d'ammonium, le cétrimide, le chlorure de lithium, le tellurite de potassium, vert malachite, entre autres.

Parfois, les médias peuvent être à la fois sélectifs et différentiels. De même, le degré de sélectivité varie d'un milieu à l'autre.

Certains sont très sélectifs, caractérisés par des conditions d'hostilité extrêmes pour la plupart des micro-organismes et où seul un petit nombre d'espèces sont capables de résister aux conditions présentes dans l'environnement et donc de croître de manière satisfaisante. Par exemple, l'agar TCBS et l'agar MRS, entre autres.

Alors que d'autres sont modérément sélectifs, c'est-à-dire ceux qui inhibent un groupe spécifique de micro-organismes, tels que les bactéries Gram positives. En revanche, ils favorisent la croissance d'une grande variété de bactéries Gram négatives; par exemple, la gélose Mac Conkey.

Enfin, il existe des milieux de culture à faible pouvoir sélectif, c'est-à-dire ceux qui permettent la croissance d'une grande variété de bactéries entre Gram positif et Gram négatif, ainsi que certaines levures, tout en n'inhibant qu'un petit groupe de microorganismes. Exemple: gélose EMB.

Milieux de culture solides sélectifs

Gélose Baird-Parker

Milieu conçu pour la détection des staphylocoques à coagulase positive (Staphylococcus aureus). Contient comme substances inhibitrices du chlorure de lithium et du tellurite de potassium.

Gélose BCYE ou Gélose tamponnée à l'extrait de charbon de levure

C'est un milieu de culture hautement enrichi, en particulier pour l'isolement des espèces Legionella et Nocardia. Ce milieu devient sélectif avec l'ajout d'antimicrobiens tels que la polymyxine B, la vancomycine et l'anisomycine.

Gélose BHI avec antibiotiques

La gélose BHI est à l'origine un milieu enrichi, mais si du chloramphénicol et du cycloheximide sont ajoutés, elle est idéale pour l'isolement sélectif de champignons d'intérêt clinique.

Gélose BIGGY

Milieu sélectif et différentiel pour l'isolement des espèces de Candida. Il contient du citrate d'ammonium, du bismuth et du sulfite de sodium, qui agissent comme des inhibiteurs de la croissance bactérienne.

Gélose Bordet Gengou

Milieu de culture enrichi et sélectif, notamment pour l'isolement de B ordetella pertussis et Bordetella parapertussis. Il contient de la céphalexine pour inhiber la flore qui l'accompagne.

Gélose campy avec du sang

Milieu utilisé pour l'isolement du genre Campylobacter. Contient de la céfopérazone, de la vancomycine et de l'amphotéricine B pour inhiber la croissance des bactéries Gram négatif, Gram positif et des champignons.

Gélose Campylobacter Butzler

Milieu spécial pour l'isolement des espèces du genre Campylobacter. Il est complété par du sang de cheval, entre autres nutriments. Il contient également diverses substances inhibitrices, telles que la novobiocine, la colistine, la céfazoline, la bacitracine et le cycloheximide.

Gélose Campylobacter Skirrow

Milieu sélectif pour l'isolement des espèces de Campylobacter. Contient du sang de cheval et d'autres nutriments. En tant que substances inhibitrices, il contient de la vancomycine, de la polymyxine B et du triméthoprime.

Gélose CCF ou gélose au fructose, cyclosérine, céfoxitine

Comme son nom l'indique, il contient de la cyclosérine et de la céfoxitine comme substances inhibitrices et est utilisé pour l'isolement de Clostridium diffcile dans des échantillons de selles, entre autres échantillons intestinaux.

Gélose cétrimide

Milieu sélectif, conçu pour l'isolement de Pseudomonas aeruginosa, favorisant la production de pigments. Le cétrimide (bromure de cétyl triméthyl ammonium) est la substance qui inhibe la croissance de bactéries autres que P. aeruginosa.

Gélose au chocolat avec isovitalex et vancomycine

Ce médium est à l'origine très enrichi. L'ajout de vancomycine est utile pour l'isolement sélectif des souches de Neisseria gonorrhoeae et de N. meningitidis.

Gélose CIN ou gélose céfsulodine, irgasan, novobiocine

C'est un milieu de culture modérément sélectif pour l'isolement des espèces Yersinia.

Gélose CNA (colistine, acide nalidixique)

C'est un milieu sélectif spécial pour l'isolement des bactéries Gram positives telles que Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus et levures, mais il inhibe le développement des bactéries Gram négatives telles que les Pseudomonas et les espèces de la famille des Enterobacteriaceae.

Gélose Czapek

Milieu conçu pour la culture de bactéries et champignons saprophytes. Ce milieu contient de l'azote inorganique. Pour cette raison, ce milieu est considéré comme sélectif, car seuls des micro-organismes capables d'utiliser des composés inorganiques comme seule source d'azote peuvent se développer.

Gélose EMB

Milieu légèrement sélectif et différentiel, utilisé pour l'isolement des Enterobacteriaceae. Escherichia coli est particulièrement détectée sur ce milieu par la couleur noir verdâtre brillante de ses colonies. Le degré de sélectivité qu'il possède est dû à la présence de colorants aniline (éosine et bleu de méthylène).

Gélose endo

Milieu peu sélectif et différentiel, utilisé pour l'isolement et la différenciation des bacilles à Gram négatif fermentant et non fermentant du lactose appartenant à la famille des Enterobacteriaceae et à d'autres familles.

Le sulfite de sodium et la fuchsine basique inhibent la plupart des bactéries Gram positives. Escherichia coli sur ce milieu produit des colonies rouge foncé caractéristiques avec un éclat métallique verdâtre irisé.

Gélose Hektoen

Milieu sélectif et différentiel pour l'isolement des bactéries entéropathogènes des genres Shigella et Salmonella. En tant que substance inhibitrice, il contient des sels biliaires, supprimant le développement des bactéries Gram positives et de certaines bactéries Gram négatives.

Gélose Löwenstein-Jensen

Milieu spécialement conçu pour l'isolement et le développement des bactéries du genre Mycobacterium, en particulier les espèces tuberculeuses, entre autres.

Le milieu contient du vert malachite; Cette substance inhibe les flores Gram positif et Gram négatif qui ont pu résister à la désinfection précédente de l'échantillon. Il contient également de la glycérine qui stimule la croissance de M. tuberculosis, mais inhibe la croissance de M. bovis et d'autres micro-organismes.

Gélose Mac Conkey

C'est un milieu sélectif et différentiel. Il est utilisé pour l'isolement de bâtonnets Gram négatifs lactose non fastidieux, fermentants et non fermentants.

Son caractère sélectif est apporté par la présence de sels biliaires et de cristal violet. Ces substances inhibent la croissance des bactéries Gram positives et de certains bâtonnets Gram négatifs fastidieux.

Gélose au mannitol salé

Gélose sélective et différentielle pour l'isolement de Staphylococcus aureus. Ce milieu a une concentration élevée de chlorure de sodium qui inhibe la croissance de la plupart des bactéries.

Gélose SS

Milieu modérément sélectif et différentiel pour l'isolement des genres Salmonella et Shigella. Le milieu contient des substances inhibitrices, telles que des sels biliaires, du citrate de sodium et du vert clair. Ces substances suppriment la croissance des bactéries à Gram positif, de certaines bactéries à Gram négatif et de certains coliformes.

Gélose Regan Lowe

Gélose sélective pour l'isolement de Bordetella pertussis. Le milieu contient du charbon, de la céphalexine et de l'amphotéricine B comme substances inhibitrices.

Gélose SABHI

Milieu sélectif pour l'isolement de champignons pathogènes, tels que les dermatophytes, Blastomyces dermatitidis et Histoplasma capsulatum. Contient du chloramphénicol.

Gélose au sang de cheval avec bacitracine

Milieu spécial pour l'isolement d'Haemophilus influenzae. La bacitracine inhibe la flore qui l'accompagne.

Gélose au charbon de sang de cheval

Milieu sélectif utile pour récupérer les souches de Bordetella pertussis et B. parapertussis à partir d'échantillons cliniques. Il contient de la céphalexine pour inhiber la flore qui l'accompagne.

Gélose au sang kanamycine-vancomycine (KV)

Milieu sélectif, spécial pour l'isolement des bactéries anaérobies, telles que Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium et Veillonella.

Gélose au sulfite de bismuth

Milieu sélectif pour l'isolement du sous-groupe de Salmonella enterica enterica sérotype Typhi. Ce milieu contient du sulfite de bismuth vert clair pour inhiber la croissance des microorganismes Gram positifs et de certaines bactéries Gram négatif.

Gélose TCBS (thiosulfate, citrate, sels biliaires)

Milieu hautement sélectif pour l'isolement des espèces du genre Vibrio. Il contient du citrate de sodium, de la bile de bœuf et un pH alcalin qui inhibe la flore qui l'accompagne.

Gélose Thayer-Martin

Milieu hautement nutritif et sélectif pour l'isolement de Neisseria meningitidis et Neisseria gonorrhoeae. La flore qui l'accompagne est inhibée par la présence de vancomycine, de colistine et de nystatine.

Agar vert vif

Milieu sélectif pour l'isolement des souches du genre Salmonella. Comme son nom l'indique, il contient du vert vif comme substance inhibitrice. Cela empêche la croissance de bactéries Gram positives et d'un grand nombre de microorganismes Gram négatifs.

Gélose Vogel-Johnson

C'est un milieu de culture sélectif et différentiel, formulé pour l'isolement de Staphylococcus aureus et inhibe la croissance des bactéries Gram négatives et même de certaines bactéries Gram positives. Les substances inhibitrices sont le tellurite de potassium, le chlorure de lithium et la glycine.

Gélose XLD

C'est un milieu sélectif et différentiel pour l'isolement des entéropathogènes Salmonella et Shigella. Le désoxycholate de sodium donne le caractère sélectif au milieu.

CHROMagar (Candida Medium)

C'est un milieu sélectif et différentiel pour aider à l'isolement et à l'identification des espèces de Candida. Le milieu contient du chloramphénicol pour inhiber la croissance des bactéries.

Middle Ellinghausen McCulough Johnson et Harris (EMJH)

Milieu sélectif pour la culture de Leptospiras. Il contient du polysorbate 80, qui inhibe la croissance de la plupart des bactéries.

Milieux de culture liquides sélectifs

Bouillon BHI NaCL 6,5%

Bouillon sélectif pour la récupération d'Enterococcus. La concentration élevée de chlorure de sodium inhibe la croissance du microbiote qui l'accompagne.

Bouillon EC

Bouillon sélectif pour la récupération des coliformes totaux et fécaux. Contient des sels biliaires qui inhibent la croissance d'autres micro-organismes.

Bouillon GN

Bouillon sélectif pour la récupération de Salmonella et Shigella. Contient du citrate de sodium et du désoxycholate de sodium, qui inhibent les bactéries Gram positives et les coliformes.

Bouillon Rappaport-Vassiliadis

C'est un milieu d'enrichissement sélectif pour les espèces de Salmonella. Contient du vert malachite comme substance inhibitrice.

Bouillon de sélénite

C'est un milieu de culture sélectif, utile pour l'enrichissement d'échantillons où la présence de bactéries entéropathogènes du genre Salmonella est suspectée.

Comme son nom l'indique, il contient du sélénite de sodium comme substance inhibitrice, supprimant la croissance des bactéries Gram positives et de la plupart des bactéries du tractus gastro-intestinal.

Bouillon au tétrathionate

Bouillon sélectif pour l'enrichissement et la récupération de souches du genre Salmonella.

Le tétrathionate formé par la réaction générée entre le thiosulfate de sodium et la solution iodée présente dans le milieu inhibe la croissance des coliformes et favorise le développement de bactéries contenant l'enzyme tétrathionate réductase (Salmonella).

Il contient également des sels biliaires et certaines variétés comprennent du vert vif; les deux substances inhibent la plupart des bactéries Gram positives et certaines bactéries Gram négatives (coliformes).

Bouillon Campy Thioglycollate

Bouillon spécial pour favoriser le développement de C. jejuni subsp jejuni. Contient de l'amphotéricine B, de la céphalothine, de la polymyxine B, du triméthropime et de la vancomycine.

Bouillon Todd-Hewitt avec du sang et des antibiotiques

Il sert à enrichir les échantillons et à favoriser le développement de Streptococcus agalactiae à partir de sécrétions vaginales. En tant que substances inhibitrices, il contient de l'acide nalidixique et de la gentamicine ou de la colistine.

Références

1. Milieux de culture de microbiologie clinique (année académique 2012-2013). Disponible sur: asignatura.us.es
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