MILIEU CARY BLAIR: JUSTIFICATION, PRÉPARATION ET UTILISATIONS - LA BIOLOGIE - 2025

Le Cary Blair moyen est une gélose semi-solide, utilisée pour le transport et la conservation d'échantillons biologiques hébergeant des agents pathogènes intestinaux, des microorganismes et des anaérobies labiles. Comme tout moyen de transport, sa fonction est de conserver l'échantillon dans des conditions optimales jusqu'à sa culture. Les microorganismes pathogènes présents, ainsi que le microbiote qui l'accompagne, doivent rester viables, mais sans augmenter leur population.

Le Cary Blair Medium est le résultat du changement de formulation du Stuart Transport Medium. La modification a été effectuée en 1964 et a consisté à remplacer le système de régulation du pH (glycérophosphate) par un tampon inorganique phosphaté.

A. Culturette avec Cary Blair Medium B. Stool Collector avec Cary Blair Medium. Source: A. Vidéo Meganhow, obtenir une culture de la plaie 2011 youtube.com B. Utilisateur: Mattes

La reformulation était nécessaire car ses créateurs se sont rendu compte que le glycérophosphate pouvait être métabolisé après un certain temps par certaines bactéries saprophytes. Ceux-ci se multiplient chevauchent les agents pathogènes présents.

D'autres changements ont été l'élimination du bleu de méthylène, ainsi qu'un réajustement du pH vers l'alcalinité (pH 8,4). Tous ces changements ont amélioré l'efficacité des moyens de transport.

À l'origine, le milieu Cary Blair était utilisé pour le maintien des agents pathogènes intestinaux, tels que Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae et Campylobacter sp.

Cependant, l'efficacité de la préservation de la viabilité d'agents pathogènes exigeants et labiles a été constatée par la suite, tels que: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae et certains anaérobies.

Base

Le milieu Cary Blair contient du chlorure de sodium, du thioglycollate de sodium, du phosphate disodique, du chlorure de calcium et de l'agar.

Le chlorure de sodium maintient l'équilibre osmotique du milieu, le phosphate disodique et le chlorure de calcium équilibrent le pH. De son côté, le thioglycolate de sodium maintient un faible potentiel d'oxydoréduction, tandis que la petite portion d'agar donne la consistance semi-solide.

Le milieu Cary Blair ne contient pas de substances nutritives, car la fonction d'un milieu de transport est de conserver l'échantillon sans qu'il subisse des modifications en termes d'humidité et de charge microbienne; c'est-à-dire qu'il évite la déshydratation de l'échantillon tout en préservant la viabilité et la quantité des microorganismes présents.

Enfin, le pH légèrement alcalin empêche la mort des microorganismes par acidité, en particulier les Vibrios sont très sensibles aux acides.

préparation

Le milieu Cary Blair est disponible dans le commerce sous forme de dispositif spécial prêt à l'emploi. Le système de transport est couvert par un sac Peel Pack en plastique. À l'intérieur, il contient un écouvillon pour recueillir l'échantillon et le tube contenant le milieu semi-solide de Cary Blair.

Il existe également sur le marché des maisons commerciales qui fournissent le milieu déshydraté pour sa préparation en laboratoire.

Pour ce faire, pesez 13,2 g de milieu déshydraté et dissolvez-le dans un litre d'eau distillée. Chauffer et agiter la préparation jusqu'à dissolution complète. Répartir le milieu dans des tubes à essai à bouchon à vis (bakélite).

Cuire les tubes à la vapeur pendant 15 minutes. Laisser refroidir et conserver à température ambiante jusqu'à utilisation.

Le milieu Cary Blair non inoculé peut être conservé de manière optimale jusqu'à 18 mois à température ambiante.

Le pH du milieu doit être ajusté à 8,4 ± 0,2. La couleur du milieu préparé est beige, avec une certaine opalescence.

Utilisation

Type d'échantillons

Cary Blair Medium est utilisé lorsque les échantillons de selles, les prélèvements rectaux et les prélèvements vaginaux ne peuvent pas être traités immédiatement.

Lorsqu'aucun moyen de transport n'est disponible, les échantillons peuvent être conservés à -70 ° C.

Prise d'échantillon

L'écouvillon est imprégné de l'échantillon et il est introduit dans le milieu Cary Blair, sans atteindre le fond.

Identification de l'échantillon

Le support Cary Blair doit porter une étiquette sur laquelle sont apposées les données de base, telles que: prénom et nom du patient, numéro d'identification de l'échantillon, source du prélèvement, médecin traitant, date et heure du prélèvement. échantillon, diagnostic présomptif, traitement antibiotique.

Transfert

Bien couvert et transporté à température ambiante dans le cas d'échantillons fécaux. Alors que, pour les échantillons vaginaux à la recherche de microorganismes anaérobies, il est recommandé de transporter les échantillons à 4 ° C.

Dans tous les cas, le temps de transfert recommandé est de 4 à 6 heures, avec un maximum de 24 heures.

Si la présence de Campylobacter jejuni est suspectée dans des échantillons de selles et que ceux-ci ne peuvent être traités dans les 24 heures, un stockage dans un milieu Cary Blair à 4 ° C est recommandé.

Recherches menées sur le moyen de transport Cary Blair

Plusieurs études ont montré que le milieu Cary Blair peut rester viable pour les microorganismes entéropathogènes du genre Shigella et Salmonella jusqu'à 49 jours après le prélèvement de l'échantillon.

Vibrio cholerae, un autre pathogène intestinal important, est capable de survivre pendant 22 jours, tandis que Yersinia pestis (agent causal de la peste bubonique et pneumonique) peut être récupéré après 75 jours.

Cependant, malgré la durabilité démontrée en termes de récupération de ces microorganismes, il est recommandé que les échantillons prélevés soient transportés dans le milieu Cary Blair jusqu'au laboratoire le plus rapidement possible.

De même, une fois que l'échantillon atteint le laboratoire, il doit être ensemencé sans délai dans les milieux de culture respectifs.

D'autre part, le milieu Cary Blair, en plus d'être utile pour le transport de microorganismes facultatifs, est également recommandé pour les échantillons contenant des agents pathogènes anaérobies.

En ce sens, DeMarco et al.En 2017 ont mené une étude intitulée: Survie des micro-organismes vaginaux dans trois systèmes de transport disponibles dans le commerce.

Ils ont démontré que le milieu de transport Cary Blair est le meilleur moyen de transport pour la conservation et la récupération des micro-organismes anaérobies vaginaux. De même, ils ont montré que le taux de récupération le plus élevé était atteint lorsque la température de transfert était de 4 ° C.

Par conséquent, il est conclu que la température de transport des écouvillons vaginaux (microorganismes anaérobies) doit être de 4 ° C. Alors que pour les échantillons fécaux à la recherche de micro-organismes facultatifs, la température idéale est la température ambiante.

Contrôle de qualité

Évaluer le contrôle de la qualité des souches connues du milieu de transport Cary Blair telles que Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae et Campylobacter sp.

Le milieu est ensemencé avec la souche choisie et conservé à température ambiante pendant 24 heures. Ils sont ensuite semés dans les milieux de culture correspondants. Dans tous les cas, une récupération satisfaisante du microorganisme en question est attendue.

Références

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et al. Survie des micro-organismes vaginaux dans trois systèmes de transport disponibles dans le commerce. Anaérobe. 2017; 45: 44–49.
2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Comparaison des milieux de conservation pour le stockage des échantillons de selles. J Clin Microbiol. Année mille neuf cents quatre-vingts-quinze; 33 (8): 2176-2178.
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