BACILLOSCOPIE: PROCÉDURE, À QUOI ÇA SERT ET TYPES - MÉDICAMENT - 2024

Le frottis est un outil de diagnostic de la tuberculose pulmonaire active. Il s'agit d'une technique de laboratoire qui permet la détection et la mesure de bacilles acido-résistants tels que Mycobacterium tuberculosis. C'est la méthode la plus largement utilisée dans le monde pour poser le diagnostic de la tuberculose pulmonaire active dans la communauté et pour évaluer les bénéfices du traitement.

La tuberculose pulmonaire est une maladie infectieuse causée par Mycobacterium tuberculosis qui infecte les poumons mais peut affecter d'autres organes et systèmes. Dans le monde, plus de 6 millions de personnes souffrent de tuberculose pulmonaire (TB).

Cellules de M. tuberculosis dans un frottis d'expectoration (Source: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) via Wikimedia Commons)

Mycobacterium tuberculosis et d'autres espèces de Mycobacterium non tuberculeuses possèdent un revêtement lipidique sur la paroi cellulaire qui est riche en acide mycolique, qui résiste à la décoloration par l'alcool acide après coloration avec des colorants basiques.

Par conséquent, des méthodes de coloration spéciales telles que la méthode Ziehl-Neelsen sont utilisées. Ces méthodes simples et peu coûteuses permettent au mur de retenir la tache lorsque l'échantillon est rincé avec une solution acide, et la paroi de Mycobacterium devient rouge contrairement aux autres bactéries qui deviennent bleues.

Pour faire une microscopie de frottis, un échantillon de crachats est nécessaire, de préférence pris le matin lorsque vous vous levez. Des échantillons de tissus ou des échantillons de fluides corporels peuvent également être utilisés.

Processus

Les échantillons à traiter pour la microscopie des frottis sont des échantillons de crachats, des échantillons de tissus ou des échantillons de fluides corporels. Les échantillons de tissus peuvent être extraits par bronchoscopie ou par biopsie des ganglions lymphatiques ou d'autres tissus.

La tuberculose pouvant affecter n'importe quel organe ou système, les échantillons peuvent être très variés, notamment: échantillons d'urine, liquide céphalo-rachidien, liquide pleural, liquide d'ascite, sang, pus de cavités ouvertes, biopsies, etc.

Les échantillons de lésions extrapulmonaires doivent également être traités pour la culture. Des échantillons de crachats sont collectés le matin au lever.

Plusieurs échantillons peuvent être prélevés à la suite ou sur des jours consécutifs. Les échantillons doivent être étiquetés dans des flacons fermés à large ouverture. Ils doivent avoir les données du patient, le type d'échantillon et la date du prélèvement de l'échantillon.

Procédure technique

- Une fois l'échantillon obtenu, il peut être centrifugé pour se concentrer ou utilisé directement. La procédure initiale consiste à déposer quelques gouttes de l'échantillon et à les étaler sur une lame.

- L'échantillon est recouvert de fuchsine filtrée (solution de coloration).

- Puis il est chauffé jusqu'à obtenir environ trois émissions de vapeur blanchâtre.

- Attendez cinq minutes que l'échantillon refroidisse et lavez-le à l'eau.

- Il est recouvert d'une solution de blanchiment (alcool acide) pendant 2 minutes.

- Il est à nouveau lavé à l'eau.

- L'échantillon est recouvert de bleu de méthylène et laissé au repos pendant une minute.

- Se lave à l'eau.

- Laisser sécher à l'air et procéder à l'observation au microscope.

Photographie prise au microscope (Image de Konstantin Kolosov sur www.pixabay.com)

Cette procédure est rapide, simple, peu coûteuse et permet aux cellules de Mycobacterium tuberculosis de se colorer en rouge. Cette technique est appelée technique de coloration Ziehl-Neelsen.

L'observation microscopique consiste à identifier la présence de bacilles acido-résistants et leur quantification par champ.

Les cellules de Mycobacterium tuberculosis apparaissent sous forme de bâtonnets rouges, granuleux et incurvés sur fond bleu. Ils peuvent être isolés, appariés ou groupés. L'observation doit être effectuée par champ et au moins 100 champs doivent être examinés pour chaque frottis.

Le résultat est considéré comme positif lorsqu'il y a, dans chaque champ, plus de 10 cellules de M. tuberculosis. Cela correspond à 5 000 à 100 000 bacilles pour chaque millilitre d'échantillon.

Dans ces cas, il est considéré comme positif pour Mycobacterium tuberculosis, car le Mycobacterium non tuberculeux ou d'autres bactéries résistantes aux acides ont des formes différentes et généralement la quantité observée par champ est inférieure à 10.

La personne qui examine l'échantillon doit avoir une expérience ou une expertise dans la détection et la reconnaissance de ces micro-organismes, car des faux négatifs ou des faux positifs peuvent exister dans les résultats.

Il existe d'autres techniques fluoroscopiques plus sensibles, mais beaucoup plus coûteuses. Une telle technique utilise la coloration à l'auramine-O, pour obtenir une fluorescence verte, ou la coloration à l'auramine O / rhodamine B, pour observer une fluorescence jaune / orange.

Les cas positifs sont généralement réalisés pour la culture et l'antibiogramme pour confirmer le diagnostic et la sélection appropriée du traitement.

À quoi sert la microscopie des frottis?

La tuberculose est une maladie infectieuse qui affecte les poumons et d'autres organes et systèmes organiques du corps. Il s'agit d'une maladie contagieuse qui provoque de graves lésions du système respiratoire qui, si elles ne sont pas traitées correctement, peuvent entraîner la mort du patient.

La tuberculose est transmise presque exclusivement par des gouttelettes en suspension dans l'air provenant de l'expectoration d'un patient atteint de tuberculose pulmonaire. Ces petites gouttelettes peuvent rester dans l'air et ont la capacité d'infecter la personne qui les inhale.

Cellules de M. tuberculosis (Source: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) via Wikimedia Commons)

L'infection nécessite un temps de contact prolongé avec un patient infecté qui crache continuellement des bacilles dans un environnement mal ventilé. Les personnes immunodéprimées sont plus susceptibles d'être infectées.

Les patients séropositifs sont plus susceptibles que le reste de la population de développer des infections respiratoires graves, y compris la tuberculose pulmonaire. D'où l'importance de la microscopie à frottis comme méthode de diagnostic rapide et peu coûteuse de la tuberculose.

La microscopie des frottis permet de poser un diagnostic bactériologique de la tuberculose, cependant, un résultat positif doit être confirmé par d'autres études.

Les études qui confirment le diagnostic de tuberculose comprennent des examens radiologiques montrant des images caractéristiques des lobes supérieurs du poumon, des tests tuberculiniques positifs et des cultures d'échantillons positives.

Frottis négatif

Une microscopie à frottis négatif n'exclut pas nécessairement le diagnostic de tuberculose, car surtout lorsque l'échantillon est des expectorations, l'élimination des bacilles n'est pas constante. Par conséquent, dans ces cas, lorsque le diagnostic est suspecté, des échantillons en série sont nécessaires.

Frottis positif

Une microscopie à frottis positif indique une tuberculose et doit être confirmée par d'autres études complémentaires. Chaque fois que le résultat est positif, une culture et un antibiogramme doivent être effectués.

Une fois le traitement établi, une diminution soutenue de l'échelle de positivité du frottis microscopique jusqu'à l'obtention de résultats négatifs, permet de contrôler les bénéfices du traitement.

Références

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