TESTS CROISÉS: À QUOI SERVENT-ILS, TECHNIQUE, JUSTIFICATION, PHASES - MÉDICAMENT

Les Crossmatch sont un certain nombre d'études de laboratoire menées pour déterminer si les produits sanguins d'un donneur (principalement du sang total et des globules emballés) sont compatibles avec le sang du receveur.

C'est un test complémentaire supplémentaire à la compatibilité ABO et au facteur Rh. La raison du croisement est que parfois deux individus (donneur-receveur) peuvent avoir le même groupe ABO et Rh, mais leur sang est toujours incompatible.

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Une telle incompatibilité est due à la présence d'anticorps contre une série de protéines de globules rouges appelées antigènes mineurs. Ces antigènes ne sont pas systématiquement testés comme ils le sont pour le groupe sanguin (ABO) et le facteur Rh.

En effet, les antigènes mineurs sont beaucoup moins fréquents et ont une expression variable chez chaque individu, il est donc pratiquement impossible de les regrouper en catégories comme cela se fait avec le groupe et le facteur Rh.

Au lieu de cela, les globules rouges du donneur sont mélangés avec le sérum du patient (test de correspondance majeur) et les globules rouges du patient avec le sérum du donneur (test de correspondance mineur) pour détecter la présence de réactions antigène-anticorps.

Lorsqu'il y a des anticorps dirigés contre des antigènes mineurs, que ce soit dans le sérum du patient ou du donneur, le test est dit positif, de sorte que dans la plupart des cas, cette unité de sang particulière ne peut pas être transfusée.

Groupe ABO

Pour bien comprendre en quoi consistent les réactions croisées, vous devez d'abord connaître les bases des groupes sanguins.

En ce sens, le plus important est de savoir que le sang peut être classé en quatre groupes: A, B, AB et O.

Chacun de ces groupes exprime à la surface des globules rouges une protéine particulière (antigène), qui est identifiée comme élément étranger par les anticorps d'un récepteur potentiel d'un groupe différent.

La chose la plus frappante à propos des réactions antigène-anticorps dans l'appariement sanguin est qu'aucune exposition préalable à l'antigène n'est nécessaire pour que les anticorps existent. Ceci est connu sous le nom d'anticorps naturels.

Anticorps naturels

En général, pour que les anticorps existent dans le corps d'un individu, il est nécessaire que les globules blancs de l'individu aient été préalablement exposés à l'antigène.

Cela signifie que lors du premier contact entre l'antigène étranger et l'organisme, il n'y a pas d'anticorps, car ceux-ci sont générés plus tard, après le contact initial. Par conséquent, il est impossible pour le système immunitaire d'avoir des anticorps contre par exemple un virus particulier, s'il n'y a pas été exposé dans le passé.

La seule exception à ce qui précède concerne les antigènes anti-AB. Dans ces cas, la personne a des anticorps contre l'antigène que ses globules rouges n'ont pas, même si elle n'a jamais été en contact avec les globules rouges d'une autre personne. Ceci est connu sous le nom d'anticorps naturels.

Antigènes et anticorps liés au groupe sanguin

Les groupes sanguins sont déterminés dans le cas du système ABO par la présence d'antigènes spécifiques (A ou B) sur la membrane des globules rouges et, au contraire, d'anticorps contre l'antigène absent sur la membrane érythrocytaire.

Ainsi, une personne du groupe sanguin A exprime l'antigène A à la surface de ses globules rouges, alors qu'il y a des anticorps anti-B dans le sérum.

Au contraire, chez les patients du groupe B, l'antigène B est trouvé tandis que les anticorps sont anti-A.

Maintenant, les patients avec du sang AB ont à la fois des antigènes A et B. Par conséquent, il n'y a pas d'anticorps car cela détruirait les globules rouges de cette personne.

Tout le contraire se produit dans le groupe O, où la membrane érythrocytaire ne présente aucun des deux antigènes (ni A ni B), alors que dans le sérum il y a des anticorps anti-A et anti-B.

Incompatibilité du groupe ABO

De ce qui précède, la compatibilité des groupes sanguins ABO peut être facilement déduite, car en connaissant l'antigène de la membrane érythrocytaire, les anticorps dans le sérum sont automatiquement connus. Donc:

- Le sang A est compatible avec le groupe A et le groupe O.

- Le groupe sanguin B est compatible avec le sang B et O.

- Les personnes du groupe O ne peuvent recevoir que du sang O (car elles ont des anticorps anti-A et anti-B), bien que leur sang soit reçu par tous les autres groupes sans problème car il manque d'antigènes.

- Finalement. ceux qui ont le groupe sanguin AB peuvent recevoir du sang de tous les autres groupes (A, B, O et bien sûr AB), car ils n'ont d'anticorps contre aucun des antigènes. Cependant, seules les personnes du groupe AB peuvent recevoir du sang AB, car tous les autres groupes possèdent des anticorps qui détruiraient ces globules rouges.

Antigènes mineurs

Comme pour les groupes ABO, une série de protéines peut être trouvée à la surface des érythrocytes qui fonctionnent comme antigènes de la même manière que les antigènes du groupe ABO.

Cependant, ces antigènes ne sont pas présents chez tous les individus. Leur combinaison est hétérogène et la pénétrance (niveau d'expression protéique) est variable, donc une classification en groupes comme celui qui existe pour ABO et Rh est impossible. C'est là qu'il tire son nom des «antigènes mineurs», également appelés «antigènes à faible incidence».

Bien qu'ils ne soient pas fréquents, il peut exister des anticorps naturels contre des antigènes mineurs. Parmi eux, les plus courants sont Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb et Kidd. Tous sont responsables de réactions hémolytiques et post-transfusionnelles très graves.

De plus, il peut y avoir le cas d'une sensibilisation contre des antigènes mineurs par contact préalable, soit avec lesdites protéines antigéniques en raison de transfusions précédentes, soit en raison d'une immunité croisée.

Immunité croisée

On dit qu'il y a immunité croisée lorsque deux antigènes de deux sources différentes (par exemple un globule rouge et une bactérie) sont très similaires, au point que les anticorps dirigés contre l'une de ces protéines antigéniques réagissent également avec l'autre car ils sont presque identiques.

Pour mieux comprendre cela, prenons l'exemple hypothétique précédent (antigènes d'un globule rouge et d'une bactérie). Dans les deux cas, il n'y a pas d'anticorps naturels, mais si une personne est exposée à la bactérie, elle produira des anticorps contre elle.

De tels anticorps réagiront plus tard contre un globule rouge si les antigènes sur le globule rouge sont très similaires à ceux des bactéries qui ont induit la formation des anticorps.

Si cela se produit, les globules rouges contenant cette protéine antigénique particulière ne peuvent pas être administrés à la personne qui a les anticorps, car il y aurait rejet. C'est là que réside l'importance des réactions croisées.

À quoi sert le crossmatching?

Puisqu'il est impossible de grouper le sang d'individus différents sur la base des antigènes mineurs, la seule façon de savoir s'il y a des anticorps contre les antigènes mineurs des globules rouges d'une autre personne dans le sang d'une personne est par croisement..

Dans les cas où des anticorps sont présents, une réaction d'hémolyse ou d'agglutination est déclenchée, c'est pourquoi il est conclu que la réaction était positive; c'est-à-dire qu'il existe des anticorps contre des antigènes mineurs (bien que l'on ne sache pas exactement lequel). Sinon, le test est négatif.

Base

Les croisements sont basés sur la réaction antigène-anticorps. Par conséquent, avec eux, il est possible de détecter s'il existe dans le sérum d'un receveur des anticorps contre les antigènes des globules rouges du donneur (ou vice versa), induisant une réaction antigène-anticorps.

S'il n'y a pas d'anticorps, aucune réaction ne se produit et le test est rapporté négatif. Au contraire, si la réaction est positive (il y a hémolyse ou agglutination pendant le test), on peut conclure que les anticorps sont présents.

À cet égard, il est important de noter qu'il peut y avoir des anticorps contre les globules rouges à la fois dans le sérum du donneur et du receveur. C'est pourquoi il existe deux types de réactions croisées.

Types de réactions croisées

Des anticorps contre les érythrocytes du donneur peuvent exister dans le sérum du patient; mais l'inverse peut également se produire, c'est-à-dire des anticorps dans le sérum du donneur contre les globules rouges du patient.

C'est pourquoi il existe deux types de crossmatch:

- Match croisé majeur.

- Match croisé mineur.

Les deux types sont effectués systématiquement dans la banque de sang avant la transfusion de produits sanguins, car si l'un des tests est positif, il existe un risque élevé de réactions transfusionnelles pouvant mettre en danger la vie du patient.

Match croisé majeur

Ce test évalue si le sérum du receveur contient des anticorps dirigés contre les globules rouges du donneur.

Si cela se produit, les produits sanguins ne peuvent pas être administrés, car une grande quantité d'anticorps présents dans le plasma du patient détruira très rapidement les globules rouges du donneur, générant ainsi des réactions catastrophiques dans le corps du receveur. Ces réactions sont si graves qu'elles peuvent mettre la vie en danger.

Match croisé mineur

Dans ce cas, il est déterminé s'il y a des anticorps contre les globules rouges du receveur dans le sérum du donneur.

Si tel est le cas, les anticorps commenceront à détruire les érythrocytes du receveur. Cependant, étant donné que la quantité d'anticorps est limitée, la réaction est moins intense; bien que ce soit toujours dangereux.

Les phases

Le match croisé majeur et mineur est divisé en trois phases:

- Une solution saline.

- Thermique ou incubation.

- Coombs.

Dans la première phase, les globules rouges et le sérum sont mélangés dans une solution saline. Ensuite, de l'albumine est ajoutée et l'échantillon est incubé à 37 ° C pendant 30 minutes pour finalement passer à la phase de coombs.

Technique

La technique de comparaison croisée est relativement simple, car elle implique l'ajout de globules rouges du donneur au sérum du patient (correspondance croisée majeure) ainsi que des érythrocytes receveurs au sérum du donneur (correspondance croisée mineure).

Afin d'induire la réaction antigène-anticorps dans un temps relativement court, une série d'étapes standardisées doit être suivie. Ces étapes sont résumées de manière simplifiée ci-dessous.

Il est important de noter que la section suivante décrit le test de compatibilité majeur, bien que les étapes soient les mêmes pour le test de compatibilité mineur, mais en échangeant l'origine des globules rouges et du sérum.

Phase saline

- Ajouter dans un tube à essai 2 gouttes de sérum du receveur (du donneur s'il s'agit du croisement mineur).

- Prélevez un échantillon de globules rouges chez le donneur (chez le receveur s'il s'agit d'un croisement mineur).

- Laver et centrifuger les globules rouges.

- Remettre en suspension dans une solution entre 3% et 5%.

- Placer une goutte de cette solution dans le tube contenant le sérum du receveur.

- Mélangez doucement.

- Centrifugeuse.

- Lisez le résultat dans la lampe d'affichage.

Phase thermique

- Ajouter 2 gouttes d'albumine à 22% dans le tube où la phase saline a été terminée.

- Incuber à 37 ° C pendant 30 minutes.

- Centrifuger pendant 15 secondes.

- Lisez le résultat dans la lampe d'affichage.

Phase de Coombs

- Retirez les cellules du tube et lavez-les avec une solution saline.

- Éliminez le surnageant.

- Ajouter deux gouttes de réactif Coombs.