QU'EST-CE QU'UNE COLORATION SIMPLE? CARACTÉRISTIQUES EXCEPTIONNELLES - LA BIOLOGIE - 2025

La coloration unique est une procédure de coloration rapide et simple dans laquelle un seul colorant est utilisé, elle est donc appelée simple. Il est principalement utilisé pour déterminer la morphologie et l'organisation des cellules présentes dans un échantillon.

Les cellules sont naturellement incolores, il est donc nécessaire de les rendre visibles d'une certaine manière lorsqu'elles sont vues au microscope.

Cellules de joues humaines colorées par simple coloration au bleu de méthylène.

Il est important de noter que les colorants utilisés dans la coloration simple doivent être basiques avec une charge positive (cationique), afin qu'ils puissent se lier spontanément à la paroi cellulaire et au cytoplasme.

Ces structures cellulaires sont chargées négativement. C'est pourquoi le colorant chargé positivement est attiré par les cellules et se lie spontanément à elles. Ainsi, toutes les cellules présentes dans un échantillon sont rapidement colorées.

Colorants utilisés pour la coloration simple

Il existe plusieurs colorants de base qui peuvent être utilisés dans le laboratoire de microbiologie. Les plus utilisés sont:

- Bleu de méthylène.

- Violet cristallisé.

- Vert malachite.

- Fuchsine basique.

Tous ces colorants fonctionnent bien dans les bactéries car ils ont des ions de couleur chargés positivement (cationiques) (chromophores).

Les temps de coloration pour la plupart de ces taches sont relativement courts. Ils vont généralement de 30 secondes à 2 minutes, selon l'affinité du colorant.

Il est important de garder à l'esprit qu'avant de colorer un échantillon par simple coloration, il doit être étendu et fixé sur la lame de verre (lame); l'échantillon étendu et fixe est appelé frottis.

Les 6 étapes pour une coloration simple

Étape 1

Placez la lame sur un support de coloration et appliquez la tache désirée. Laissez agir le temps correspondant.

Normalement, une coloration simple prend de quelques secondes à quelques minutes, selon la tache utilisée.

Observation

Dans cette étape, il est important de ne pas dépasser le temps recommandé pour le colorant utilisé, car des cristaux pourraient se former sur la feuille, produisant ce que l'on appelle des "artefacts" qui déforment la morphologie des cellules.

Étape 2

Lavez soigneusement le frottis de la lame avec de l'eau distillée d'une bouteille, ou également avec de l'eau du robinet qui coule lentement, jusqu'à ce que le ruissellement devienne clair. Cela prend généralement 5 à 10 secondes.

Observation

N'appliquez pas le jet d'eau directement sur le frottis, pour éviter que la force du même endommage l'échantillon.

Si vous n'avez pas d'eau distillée, vous pouvez utiliser l'eau du robinet sans problème car cela n'affectera pas le résultat de la coloration.

Étape 3

Éponger la lame avec des serviettes en papier absorbant dans un sens et sans frotter. Assurez-vous que le dessous de la lame est propre.

Étape 4

Observez le frottis taché au microscope. Commencez par les objectifs les plus éloignés pour localiser correctement la zone que vous souhaitez observer plus en détail. Modifiez l'objectif pour vous rapprocher de plus en plus de l'échantillon.

Observation

Pour l'utilisation de l'objectif avec un grossissement plus élevé (normalement 100X), une huile d'immersion doit être utilisée, car cela aide la lumière à mieux pénétrer et l'image semble plus nette. Il n'est pas nécessaire d'utiliser une lamelle.

Étape 5

Enfin, jetez tous les échantillons dans un récipient approprié qui est correctement étiqueté «biohazard».

Références

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5. Prescott, H. (2002). Exercices de laboratoire en microbiologie (5 ^e). Les sociétés McGraw-Hill.
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