TESTS BIOCHIMIQUES: TYPES, À QUOI ILS SERVENT ET IMPORTANCE - LA BIOLOGIE - 2025

Les tests biochimiques en microbiologie sont un ensemble de produits chimiques de test qui sont portés aux microorganismes présents dans un échantillon afin de les identifier; Ces micro-organismes sont généralement des bactéries. Il existe un grand nombre de tests biochimiques disponibles pour un microbiologiste.

Cependant, le choix de ces tests est basé sur des résultats préliminaires, tels que le modèle de coloration de Gram et les traits de croissance, qui permettent d'attribuer les bactéries à une catégorie particulière. Les tests biochimiques sont principalement basés sur les propriétés métaboliques de chaque type de bactéries.

Toutes les bactéries n'ont pas les mêmes propriétés, il est donc recherché si elles possèdent une enzyme particulière en ajoutant le substrat et en attendant que la réaction se produise. Cette détermination est généralement donnée par un changement de couleur ou de pH dans le milieu de culture.

Moins de 15 tests biochimiques sont souvent nécessaires pour une identification fiable d'une bactérie jusqu'au niveau de l'espèce. Effectuer davantage de tests biochimiques peut augmenter la confiance dans l'identification.

La plupart de ces tests biochimiques sont effectués sur du sérum ou du plasma sanguin. Cependant, ils peuvent également être effectués sur d'autres sécrétions biologiques telles que: l'urine, le liquide céphalo-rachidien, le liquide pleural et les selles, entre autres.

Classification

Les tests biochimiques peuvent être classés en 3 groupes:

Universel

Ce sont les tests qui peuvent être effectués sur n'importe quel échantillon et qui guident le microbiologiste sur les tests biochimiques suivants qui doivent être effectués pour obtenir une identification fiable.

Exemple

Le test de la catalase et de l'oxydase.

Différentiels

Ce sont les tests effectués pour identifier les microorganismes présents dans l'échantillon jusqu'au niveau de l'espèce.

L'identification est faite sur la base des résultats d'une combinaison de tests, car les résultats individuels ne sont pas suffisamment informatifs pour permettre l'identification.

Exemple

Tests IMViC et tests d'utilisation du sucre.

Spécifique

Ce sont des tests spécifiques pour un ensemble particulier d'espèces ou pour sous-typer une espèce. Ces tests sont généralement effectués pour confirmer ou identifier au niveau de la sous-espèce. Les tests individuels sont informatifs en eux-mêmes.

Exemple

Le test de la γ-glutamyl aminopeptidase.

Types de tests biochimiques

Le test de la catalase

Le test de catalase est un test pour démontrer la présence de l'enzyme catalase en décomposant le peroxyde d'hydrogène en oxygène et en eau. Une petite quantité de bactéries est ajoutée à une goutte de peroxyde d'hydrogène (3%) sur la lame.

Le test de catalase est un test simple utilisé par les microbiologistes pour aider à identifier les espèces de bactéries et à déterminer la capacité de certains microbes à décomposer le peroxyde d'hydrogène en produisant l'enzyme catalase.

Si des bulles d'oxygène sont observées, cela signifie que les bactéries possèdent l'enzyme catalase, car elle catalyse la décomposition du peroxyde d'hydrogène en oxygène et en eau. On dit alors que l'organisme est catalase positif (par exemple Staphylococcus aureus).

Le test de l'oxydase

Ce test est utilisé pour identifier les micro-organismes qui contiennent l'enzyme cytochrome oxydase (importante dans la chaîne de transport d'électrons). Il est couramment utilisé pour distinguer les familles des entérobactéries et des pseudomadacées.

La cytochrome oxydase transfère les électrons de la chaîne de transport d'électrons à l'oxygène (l'accepteur d'électrons final) et le réduit en eau. Des molécules artificielles donneuses et accepteuses d'électrons sont fournies dans le test d'oxydase.

Lorsque le donneur d'électrons est oxydé par l'action de la cytochrome oxydase, le milieu devient violet foncé et est considéré comme un résultat positif. Le microorganisme Pseudomonas aeruginosa est un exemple de bactérie oxydase positive.

Test de gélose au mannitol salé (MSA)

Ce type de test est à la fois sélectif et différentiel. La MSA sélectionnera des organismes capables de vivre dans des environnements à fortes concentrations de sel, comme les espèces Staphylococcus contrairement aux espèces Streptococcus, dont la croissance est inhibée dans ces conditions.

Le composant différentiel dans ce test est le sucre mannitol. Les organismes capables d'utiliser le mannitol comme source de nourriture produiront des sous-produits de fermentation, qui sont acides et abaissent ainsi le pH du milieu.

L'acidité du milieu fait jaunir l'indicateur de pH, le rouge phénol. Des exemples d'espèces de bactéries qui peuvent être différenciées par cette méthode sont: Staphylococcus aureus (positif car il fermente le mannitol) et Staphylococcus epidermidis (négatif car il ne fermente pas le mannitol).

Test de coagulase

La coagulase est une enzyme qui aide le plasma sanguin à coaguler. Ce test est réalisé sur des espèces de bactéries Gram positives et catalases positives pour identifier Staphylococcus aureus (coagulase positive). En fait, la coagulase est un facteur de virulence de cette espèce bactérienne.

La formation de caillots autour d'une infection causée par cette bactérie la protège probablement de la phagocytose. Ce test est très utile lorsque vous souhaitez différencier Staphylococcus aureus des autres espèces de Staphylococcus à coagulase négative.

Le test d'uréase

Ce test est utilisé pour identifier les bactéries capables d'hydrolyser l'urée à l'aide de l'enzyme uréase. Il est couramment utilisé pour distinguer le genre Proteus des autres bactéries entériques.

L'hydrolyse de l'urée produit de l'ammoniac comme l'un de ses produits. Cette base faible augmente le pH du milieu au-dessus de 8,4 et l'indicateur de pH (rouge phénol) passe du jaune au rose. Un exemple de bactérie positive à l'uréase est Proteus mirabilis.

À quoi servent les tests biochimiques?

Les tests biochimiques en microbiologie sont utilisés pour diagnostiquer les maladies causées par les microbes et pour suivre les traitements administrés pour les combattre. De plus, ils sont utilisés pour le dépistage des maladies infectieuses et pour leur pronostic.

L'identification biochimique des micro-organismes offre une idée de ce que ces micro-organismes sont capables de faire, étant possible la discrimination de différentes souches d'une même espèce par des profils biochimiques spécifiques.

Les différences dans les activités enzymatiques spécifiques informent l'écologie, la physiologie ou l'habitat naturel du micro-organisme, qui dans certains cas peuvent être considérées comme des informations importantes.

Importance

Les différences structurelles dans la forme, la taille et la disposition des bactéries n'aident guère dans le processus d'identification, car il existe de nombreuses espèces de bactéries de forme, de taille et de disposition similaires.

Pour cette raison, l'identification des bactéries repose en fin de compte principalement sur les différences dans leurs activités biochimiques.

Chaque espèce de bactérie a un ensemble bien défini d'activités métaboliques différentes de toutes les autres espèces. Ces «empreintes digitales» biochimiques sont des propriétés contrôlées par des enzymes bactériennes.

Ainsi, les tests biochimiques sont importants car ils aident le chercheur à identifier correctement les agents pathogènes présents dans un échantillon et, de cette manière, à pouvoir recommander le traitement approprié au patient.

Références

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